当前批准上市的新冠肺炎检测试剂主要包括两类,一类是核酸检测试剂,一类是抗体检测试剂。随着对疾病的认识和研发工作的进展,将来还会有更多的检测试剂和方法投入使用。
第一类的核酸检测过程包括标本处理、核酸提取、进行PCR检测等多个步骤,平均检测时间需要2-3个小时。由于它是直接对我们采集标本中的病毒核酸进行检测,特异性强,敏感度相对较高,是当前主要的检测手段。
第二种抗体检测,包括胶体金法和磁微?;Х⒐夥?span data-darkmode-color="rgb(167, 167, 167)" data-darkmode-color-16022370176992="rgb(163, 163, 163)" data-darkmode-original-color="rgb(63, 63, 63)" data-darkmode-original-color-16022370176992="rgb(63, 63, 63)" data-style="color: rgb(63, 63, 63); visibility: visible;" style="margin: 0px; padding: 0px; max-width: 100%; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; color: rgb(63, 63, 63); visibility: visible;">。其中胶体金法平均检测时间15分钟左右,磁微?;Х⒐夥ㄒ话阈枰?0—60分钟??固寮觳馐嵌匀颂逖褐械目固逅浇屑觳?,在疾病的感染早期,人体内可能还没有产生抗体,所以它存在检测的窗口期。因此,抗体检测可用于对核酸检测阴性的病例进行辅助诊断,也可以对病例进行排查筛查,但是还不能代替核酸检测方法。
接下来就为大家详细阐述新冠基因核酸测试法,即RT-PCR法。
1、 与常规PCR反应相比,试剂中要增加荧光试剂,插入DNA片段中,用于定量检测。
2、 PCR,扩增新冠病毒的目标DNA片段。
3、 Ct值,即PCR扩增循环数目,当初始病毒DNA浓度较高时,达到某一荧光强度的循环数目越少。
4、 检测设备和试剂:B2型生物安全柜,RT-PCR仪,超纯水机,核酸检测试剂盒。
参照2020版中国药典3407 外源性DNA残留量测定法,实验用水应使用超纯水,否则可能由于实验用水中含有有机物、酶、离子等造成实验失败或污染,如下表所示。
问题 |
可能原因 |
无模板对照中有信号存在,且或熔解曲线图中出现多个峰 |
模板或试剂被核酸(DNA、 cDNA) 污染。 |
存 在 引 物二聚体或其它特殊结构。 |
|
定量 PCR 图或凝胶上无明显的 PCR 产物 |
模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。 |
PCR 效率超过 110% |
模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。 |
分析实验室用水建议
实验室 |
实验项目 |
水质要求 |
理化室 |
仪器分析 |
一级超纯水(终端精制器) |
常规理化实验 |
三级纯水 |
|
试剂配制 |
三级纯水 |
|
器具精洗 |
三级纯水 |
|
微生物室 |
培养基配制 |
三级纯水 |
分子生物学实验 |
一级超纯水 |
|
Elisa实验(配液,洗板) |
一级超纯水 |
|
动物实验室 |
清洁级动物饮用水 |
无菌水(终端精制器) |
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讲座主题
制药企业实验室用水要求
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如需了解详情,欢迎咨询东锐科技产品经理
黄经理
当前批准上市的新冠肺炎检测试剂主要包括两类,一类是核酸检测试剂,一类是抗体检测试剂。随着对疾病的认识和研发工作的进展,将来还会有更多的检测试剂和方法投入使用。
第一类的核酸检测过程包括标本处理、核酸提取、进行PCR检测等多个步骤,平均检测时间需要2-3个小时。由于它是直接对我们采集标本中的病毒核酸进行检测,特异性强,敏感度相对较高,是当前主要的检测手段。
第二种抗体检测,包括胶体金法和磁微?;Х⒐夥?span data-darkmode-color="rgb(167, 167, 167)" data-darkmode-color-16022370176992="rgb(163, 163, 163)" data-darkmode-original-color="rgb(63, 63, 63)" data-darkmode-original-color-16022370176992="rgb(63, 63, 63)" data-style="color: rgb(63, 63, 63); visibility: visible;" style="margin: 0px; padding: 0px; max-width: 100%; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; color: rgb(63, 63, 63); visibility: visible;">。其中胶体金法平均检测时间15分钟左右,磁微?;Х⒐夥ㄒ话阈枰?0—60分钟??固寮觳馐嵌匀颂逖褐械目固逅浇屑觳?,在疾病的感染早期,人体内可能还没有产生抗体,所以它存在检测的窗口期。因此,抗体检测可用于对核酸检测阴性的病例进行辅助诊断,也可以对病例进行排查筛查,但是还不能代替核酸检测方法。
接下来就为大家详细阐述新冠基因核酸测试法,即RT-PCR法。
1、 与常规PCR反应相比,试剂中要增加荧光试剂,插入DNA片段中,用于定量检测。
2、 PCR,扩增新冠病毒的目标DNA片段。
3、 Ct值,即PCR扩增循环数目,当初始病毒DNA浓度较高时,达到某一荧光强度的循环数目越少。
4、 检测设备和试剂:B2型生物安全柜,RT-PCR仪,超纯水机,核酸检测试剂盒。
参照2020版中国药典3407 外源性DNA残留量测定法,实验用水应使用超纯水,否则可能由于实验用水中含有有机物、酶、离子等造成实验失败或污染,如下表所示。
问题 |
可能原因 |
无模板对照中有信号存在,且或熔解曲线图中出现多个峰 |
模板或试剂被核酸(DNA、 cDNA) 污染。 |
存 在 引 物二聚体或其它特殊结构。 |
|
定量 PCR 图或凝胶上无明显的 PCR 产物 |
模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。 |
PCR 效率超过 110% |
模板中含有抑制剂、核酸酶或蛋白酶,或模板已被降解。 |
分析实验室用水建议
实验室 |
实验项目 |
水质要求 |
理化室 |
仪器分析 |
一级超纯水(终端精制器) |
常规理化实验 |
三级纯水 |
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试剂配制 |
三级纯水 |
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器具精洗 |
三级纯水 |
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微生物室 |
培养基配制 |
三级纯水 |
分子生物学实验 |
一级超纯水 |
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Elisa实验(配液,洗板) |
一级超纯水 |
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动物实验室 |
清洁级动物饮用水 |
无菌水(终端精制器) |
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