德国默天旎推出新一代流式抗体——REAfinity流式抗体,即Recombinant Engineered Antibody,此类抗体背景值低,特异性好,解决了流式染色中的几大问题,如同型对照难选、经常需阻断Fc片段非特异性结合等难题。
1、什么是REAfinity流式抗体:
◆ 挑选最佳克隆号的抗体,以该抗体序列作为改造的基础,所以REA抗体亲和力更高、特异性更好;
◆该抗体是Fab段序列+ humanIgG1 Fc段序列;
◆ 抗体Fab段决定特异性,Fc段起骨架支撑作用;
◆ 对Fc段序列进行点突变,使其不会对Fcγ受体产生非特异性结合;
◆ 抗体Fc段和Fc受体的非特异性结合是设置同型对照和封闭步骤的原因,改造或突变后就能消除这种非特异性结合的影响;
◆该重组序列通过基因工程技术,在HEK293细胞株中表达纯化,相对于传统的杂交瘤抗体,纯度更高、特异性更好。
2、REAfinity抗体应用match示例
REA154抗体检测鼠Dectin-1+细胞(特异性更好、染色指数更高)
REAfinity抗体不会对Fcγ受体产生非特异性结合,无需封闭步骤,甚至可以不用同型对照。
3、REAfinity流式抗体优势:
1)同型对照选择极其简单——通用同型对照
所有REAfinity抗体的Fc段均为human IgG1亚型;可以共用同一种同型抗体REA293。
由于胞内抗体和表面抗体、human抗体和mouse抗体浓度有所不同,所以同一种同型抗体分为四种:
· Human Surface REA293;
· Human Intracellular REA293;
· Mouse Surface REA293;
· Mouse Intracellular REA293;
客户根据实验选择一类对应的荧光素即可。
2)更好的抗体纯度,无批次间差异
相对于传统杂交瘤抗体,基因工程抗体优势明显。